在物理學(xué)中,分光光度法是對(duì)電磁光譜的定量研究。由于分光光度法處理可見(jiàn)光、近紫外和近紅外,它比一般術(shù)語(yǔ)電磁光譜更具體。此外,該術(shù)語(yǔ)不包括時(shí)間分辨率光譜技術(shù)。
分光光度法涉及使用分光光度計(jì)。分光光度計(jì)是一種光度計(jì)(用于測(cè)量光強(qiáng)度的裝置)。它可以測(cè)量強(qiáng)度作為顏色函數(shù),或者更具體地說(shuō),光的波長(zhǎng)。分光光度計(jì)有很多種。對(duì)它們進(jìn)行分類的最重要區(qū)別包括它們使用的波長(zhǎng)、它們使用的測(cè)量技術(shù)、它們?nèi)绾潍@得光譜以及它們?cè)O(shè)計(jì)用來(lái)測(cè)量的強(qiáng)度變化源。分光光度計(jì)的其他重要特征包括光譜帶寬和線性范圍。
分光光度計(jì)最常用的應(yīng)用可能是測(cè)量光吸收,但它們可以用來(lái)測(cè)量漫反射或鏡面反射。嚴(yán)格地說(shuō),即使發(fā)光儀器發(fā)射了一半,它也是一個(gè)分光光度計(jì)。
簡(jiǎn)述分光光度法的種類。
分光光度計(jì)有兩種類型;單光束和雙光束。雙光束分光光度計(jì)測(cè)量?jī)蓷l不同光路上的光強(qiáng)比,單光束分光光度計(jì)測(cè)量絕對(duì)光強(qiáng)。雖然比率測(cè)量更容易,通常更穩(wěn)定,但單光束儀器有優(yōu)勢(shì);例如,它們可以有更大的動(dòng)態(tài)范圍,并且可以更緊湊。
從歷史上看,分光光度計(jì)使用單色計(jì)來(lái)分析光譜,但也有分光光度計(jì)和使用光傳感器陣列。特別是對(duì)于紅外分光光度計(jì),一些分光光度計(jì)使用傅里葉變換技術(shù)更快地獲取光譜信息,這被稱為傅里葉變換紅外。
分光光度計(jì)通過(guò)給定溶液的光比來(lái)定量測(cè)量。在分光光度計(jì)中,從光中引導(dǎo)的光通過(guò)單色裝置,從連續(xù)光譜中選擇特定波長(zhǎng)的光。光穿過(guò)測(cè)量的樣品。取樣后,用光電二極管或其他光傳感器測(cè)量剩余光的強(qiáng)度,然后計(jì)算波長(zhǎng)的透射率。
簡(jiǎn)而言之,分光光度計(jì)中的檢測(cè)順序如下:
①光源通過(guò)樣品照射;
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?、蹤z測(cè)器檢測(cè)樣品吸收了多少光;
?、苋缓髾z測(cè)器將樣品吸收的光量轉(zhuǎn)換成一個(gè)數(shù)字;
?、葸@些數(shù)字要么直接繪制,要么傳輸?shù)接?jì)算機(jī)進(jìn)行進(jìn)一步處理(如平滑曲線和基線校正);
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